생물/분자생물학11 CRISPR 가위 세균 또는 고세균에서 발견되는 일종의 적응 면역 기작이다. 이를 이용해여 현재의 3세대 유전자 가위로 사용되고 있는 생물학계 대혁신적인 기술이라고 볼 수 있겠다. (그만큼 말도 많고 탈도 많지만) 이외에도 여러 역사나 관련된 내용은 많지만 우리가 시험에 필요한것은 문제에 필요한 CRISPR의 기작이다. 만일 관련된 내용이 궁금하다면 책 "코드 브레이커"를 추천한다. CRISPR/Cas9 은 세균에 바이러스가 침입했을때 그 바이러스의 DNA 서열을 *기억해 두었다가 재침입시 인식되면 바로 *잘라서 분해한다. 1. 바이러스 서열 기억 바이러스가 들어오면 그 일부가 PAM 옆에 삽입되는데 이것을 protospacer이라고함 PAM: (protospacer-adjacent motif)라는 5'-NGG-3' 서열.. 2023. 11. 1. DNA의 2차 구조: A형 B형 Z형 생체 내에서 가장 흔하게 발견할 수 있는 DNA의 구조는 B-DNA이다. 왓슨과 크릭이 제시한이 대표적인 DNA 구조 외에도 주변 환경에 따라서 그 구조는 조금씩 달라진다. 학습 포인트: 각 구조의 특징을 암기하자 (염기쌍, 나선성, 주변 환경) 1. DNA의 다양한 구조 B A Z 염기쌍 10 11 12 helix sense 우나선성 우나선성 좌나선성 (높은 염농도에 의한) 구조 DsDNA DNA-RNA, RNA-RNA (dsRNA) 통통한 형태 날씬한 형태로 매우 길게 신장되어 있는 형태 -응축된 구조로 유전자 발현 되지 않음 -주홈 (major groove) 없음 -Na+ 즉 염과 같이 양전하 이온이 높은 농도의 환경에서 존재함 주변환경 물이 풍부한 환경 (생리적인 조건) 고농도의 염이 존재하거나 .. 2023. 1. 22. 혈액형의 종류 - ABO, RH ★ 혈액 응집반응 (Agglutination) -응집원 A를 가지면 수혈받는 대상이 응집소 β를 가지거나 응집소가 없는 경우이다. - 반대로 응집원 B를 가지면 수혈받는 대상이 응집소 α를 가지거나 응집소가 없어야 함 혈액형 혈구 응집원 항원 혈청 응집소 응집 시험 A형 표준혈정 항-B 혈정 B형 표준 혈정 항-A 혈청 A A N-acetylgalactosamine β (-) 비응집 (+) 응집 or 용혈 B B Galactose α + - AB A 와 B - + + O - H 항원 α, β - - - ABO 항원의 차이는 적혈구 표면의 당사슬의 서열의 차이로 발생하며 서열은 아래와 같다. *F = fucose, G = galactose, N = N- acetylgalactosamine, C= ceramid.. 2022. 10. 30. ELISA (Enzyme - linked immunosorbent assay) ★ ELISA는 항원-항체 반응을 이용하여 생체시료 중에 포함된 항원 단백질의 양을 정량 하는 방법이다. 특히나 호르몬 정량할때 많이 쓰인다. 특히나 AIDS test 가 대표적인 ELISA이다. ELISA는 크게 세가지로 ( Direct, Indirect, Sandwich) 구분할수 있다. 공통적으로 항체 끝에 붙어있는 효소가 기질과 반응하면 발색반응이 일어나는데 이 발색정도를 관찰하여 흡광도를 측정한다. a) Direct ELISA 장점 ELISA 종류중 가장 빠르고 간단함 단점 항원에 대해 이용 가능한 항체가 1종류임 (항체의 특이성이 높은 경우에 사용됨); 그래서 primary 항체 선택권이 좁음 아래서 설명할태지만 2차 항체의 부재로 신호 증폭이 존재 하지 않음 그래서 감광도 (sensitivity.. 2022. 9. 16. DNA repair - 돌연변이 복구 기작 ☆ DNA 복제 과정은 아주 복잡하고 정교한 교정 시스템이 존재하더라도 mismatch나 여러 변이원에 의해서 손상을 받을수 있는데, 이러한 damage가 어떤 경로로든 복구되지 않는다면 매우 유해한 결과를 초래할수 있다. (ex. 암이나 유전병등의 질환) DNA damage reversal: DNA 손상 복귀 일반적으로 염기나 뉴클레오타이드(NT로 지칭하겠다.)의 제거 과정없이 특정 효소가 왜곡된 부위의 서열을 정상적으로 돌려주는 가장 간단한 복구과정이다. 메틸기 제거 (Methyl removal) DNA 복제과정중 자연스럽게 변형된 염기가 생성되며 특정 효소의 활성으로 정상적인 염기로 복귀 가능 MGMT 라는 알킬전이효소가 O6-Methylguanine (변형된 구아닌)의 메틸기를 특이적으로 인식하여 자.. 2022. 9. 5. 라이브러리 (DNA Library) 흔히 라이브러리는 책들과 다양한 자료들을 보관하여 지식을 보관하기 위한 장소이지만. 분자 생물학에서 쓰이는 DNA library는 특정 개체의 DNA fragment라는 자료를 백터에 넣어 대장균에 형질전환하여 보관하는것이 목적이다. 이렇게 생성된 라이브러리는 특정 생물체의 모든 단일 유전자를 포함할수 있을 정도로 방대한 양의 클론이 존재한다. 추후 여기서 필요한 DNA를 사용하기 위해 유전자 스크리닝 (screening)을 실행한다. 보통 이런 순서로 기억하면 좋다. 벡터로 형질전환 → 클로닝으로 DNA 증폭 → 라이브러리 생성 → 스크리닝 https://31915.tistory.com/10?category=959061: 클로닝 참고 크게 두 종류의 라이브러리를 알고 있으면 된다. 1. gDNA Lib.. 2022. 9. 5. 이전 1 2 다음 반응형
