생물74 벡터 (Vector) ★ 저번 클로닝 포스트에서 가볍게 벡터라는 DNA 운반체에 대해 알아봤는데, 이번 포스트에서는 좀 더 다양한 종류의 벡터에 대해 요약해보고자 한다. 벡터의 용량 - 첫번째로 가장 많이 쓰이는 벡터의 종류인 플라스미드가 있다. 최대 10 kilobase 까지 운반이 가능하지만 좀 더 큰 용량의 DNA를 운반하기 위한 벡터들도 존재한다. 벡터들을 크기순으로 표기 하면 플라스미드 < 코스미드 (Cosmid): ~50kb < BAC ~300kb < YAC ~1 Mb라고 가볍게 외워주면 좋을꺼 같다. 깊게 물어보거나 자주 출제 되는 내용들을 아니기에 각각 특징들을 여기서 자세히 설명하지는 않을 것 이다. 그리고 기본서에 워낙 잘 설명되어 있다... 발현 벡터 (Expression vector) 기존 벡터의 조건에서;.. 2022. 8. 20. DNA 테크놀로지 - 미니 프랩이란? Mini-Prep 미니 프렙(Mini-prep): 대장균이 증폭한 플라스미드들을 회수하는 실험법 실험 과정 원심분리해서 박테리아를 수확함 용액 I 와 리소자임을 첨가 후 현탁 용액 I: 50mM 포도당, 10mM EDTA, 25mM Tris-HCl(pH 8.0) 포도당: 세포 안팎의 삼투압 균형을 맞춰서 세포가 터져 DNA가 손상되는것을 방지 EDTA: 세포벽을 불안정하게 만듬; nuclease활성의 cofactor인 2가 이온을 제거 용액 II 첨가 후 혼합 용액 II: 0.2 N NaOH, 1.0% SDS NaOH: 단백질, DNA를 변성 SDS: 계면활성제로써 세포막을 파괴 SDS-PAGE에서 사용될때는 2개의 아미노산마다 음전하를 추가하는 역활. (꼭 구분할것) 용액 III 첨가 후 혼합 용액 III: 3M 아세트.. 2022. 8. 19. DNA 테크놀로지: 클로닝 1. 클로닝: 관심이 있는 DNA 절편을 백터에 넣어 세포에 도입한 후, 세포를 증식하여 충분한 양의 DNA를 얻는 과정 a. 필요 개념 i) 제한효소: Restriction endonuclease: 세균이 바이러스 특히 박테리오파지로부터 자신을 방어하기 위해 생산하는 효소이자 방어 메커니즘이다. 이중가닥 DNA의 특정 염기서열을 인식해서 인산다이에스테르 결합을 끊는 효소이다. 메틸화 효소들아 N6-methyladenosine(N6-메틸 A)/N4-methylcytidine (N4-메틸C) 같은 변형염기들을 만들어 제한효소가 인식하지 못하게 하여 세균 자신의 염기가 절단되는것을 방지함. 회문 구조 서열 인식 (Palindromic sequence) 하여 절단 무딘 말단 (Blunt end) 혹은 점착성 .. 2022. 8. 19. 염기 돌연변이 ★ 돌연변이의 종류 1. 염기 돌연변이(Coding region) a) 치환: substitution - 전이(Transition): 퓨린이 퓨린으로, 피리미딘이 피리미딘으로 바뀌는 것. (ex: G ↔ A ; T ↔ C) - 전좌 (Transversion): 퓨린이 피리미딘으로, vice versa. (ex: G ↔ C or T; A ↔ T or C..etc) i) 침묵 돌연변이: Silent mutation (동의 돌연변이) - 염기가 바뀌었음에도 번역했을때 아미노산이 그대로인 경우. - 생물체에 아무런 영향을 주지 않는다. ii) 미스센스 돌연변이 (Missense mutation) 비동의 돌연변이 - case 1: 바뀐 염기로써 아미노산이 달라지지만 단백질 기능에 큰 영향이 없는 경우. 이러한 경우 .. 2022. 8. 18. 핵산 합성 억제제: 퀴놀론류와 엽산 길항제 - ★ Quinolone 계 항생제는 대개 Fluoroquinolone; FQ 이 주로 쓰인다. Gram positive 와 negitive 에 모두 효과적이여서 광범위하게 쓰인다. https://31915.tistory.com/3: 세포벽 억제제 세팔로스포린 처럼 4세대로 나뉘어져 있는데 세세하게 알기에는 학습목표와 거리가 머니 너무 자세히는 다루지 않고 표시만 해두겠다. Quinolone : a. 작용기전: 세균의 성장과 복제 과정에 필요한 DNA gyrase; topoisomerase II 와 topoisomerase IV를 억제하여 세균의 DNA 복제를 억제한다. b.종류 2 세대: Fluoroquinolone: Ciprofloxacin, Norfloxacin 3 세대: Levofloxacin 4 세대:.. 2022. 8. 17. 단백질 합성 억제제 (Protein synthesis inhibitor) 세균의 리보솜을 (50S와 30S) 타겟으로 하여 향균 작용을 나타내는 항생제들이다. 마찬가지로 자주 언급되거나 문제에 출제됬거나 가능성이 높은 항생제들은 bold처리 해두었다. 참고바람 1. Tetracycline a. 매커니즘: 세균의 리보솜의 30S 소단위체에 결합하여 tRNA 진입을 억제함으로써 세균의 단백질 합성을 억제한다. b. 향균 범위: 매우 광범위 하다. Gram postive 와 negitive에 모두 효과적이며 그 외에 다른 다양한 균에도 향균작용를 나타낸다. c. 종류: Demeclocycline Doxycycline Minocyclin Tetracyclin d. 부작용: 태아의 간독성, 치아나 뼈에 결합하여 형성부전등을 유발할수 있다. 2. Aminoglycoside a. 매커니즘.. 2022. 8. 16. 이전 1 ··· 9 10 11 12 13 다음 반응형
